應用蛋公雞肝細胞於戴奧辛之生物檢測

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題名:	應用蛋公雞肝細胞於戴奧辛之生物檢測
作者:	楊子諒
貢獻者:	生物科技研究所
關鍵詞:	戴奧辛肝細胞初代培養細胞色素基因1A 生物檢測法
日期:	2007
上傳時間:	2009-09-01 09:43:11 (UTC+8)
摘要:	環境荷爾蒙是一種體外的化學物質，當進入體內時會讓人體的內分泌系統誤認為荷爾蒙，與人體細胞中正常荷爾蒙受體結合，而干擾人體內分泌系統，造成對人體或各種發育的障礙。近年來，發現戴奧辛具有「環境荷爾蒙」的作用，嚴重影響環境生態與人類的健康而引起全世界的高度關切。本研究利用蛋種雞場之淘汰蛋雛公雞建立雛雞肝細胞初代培養系統，藉由分析細胞色素1A (cytochrome P450 1A,CYP 1A)基因的表現量，來作為戴奧辛類化合物的含量指標。細胞培養先以含血清的Leibovitz-15 medium (10% FBS)培養一天，再以不含血清的培養液培養兩天，同時以不同濃度戴奧辛（10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、100、101、102 nM）刺激兩天後，萃取細胞之RNA，利用反轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR) 分析CYP 1A基因的表現量，以了解細胞對戴奧辛類化合物的反應。由in vitro試驗結果顯示，肝細胞經10-5 ~102 nM之2,3,7,8-TCDD刺激後可誘導CYP 1A基因的表現，且產生有劑量效應(Dose-dependent response)。本研究雖然無法提供戴奧辛類化合物的毒性當量或濃度，但由實驗結果可辨別出戴奧辛類化合物有無污染的定性反應，因此可作為傳統化學分析前期的快速檢測。未來戴奧辛類化合物的檢測可以生物快速篩選方式先行篩選，檢測出有戴奧辛類化合物存在之樣品，再進一步的以傳統化學分析來確認，如此可有效、快速的解決在短時間內需處理的污染事件，以保障消費者大眾的權益。
顯示於類別:	[生物科技研究所 ] 博碩士論文

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